IP01 组件清单:从裂解液到磁力架的 11 件套
分子互作富集试剂盒 · 产品选型 · 蛋白质互作 IP
从基因序列到互作蛋白:IP01/IP02 把质谱级 Co-IP 做成了成品试剂盒
3×FLAG 标签体系 · 7 种规格/组合 · 市场同类成品稀缺
传统 Co-IP 的做法是:自己构建带标签的载体、自己买磁珠、自己配裂解液和洗液、自己摸洗脱条件。每一步都能做,但每一步都可能让末端的质谱结果不可用。IP01 把这些步骤收进一个盒子,输入是 Bait 的编码序列,输出是可直接上机的质谱级互作蛋白样本。
一、盒子里到底装了什么
IP01 分 PART A 与 PART B,共 11 个组件。拆开看,正好对应 Co-IP 的每一个易错点:
| 组件 | 作用 | 对应解决的坑 |
|---|---|---|
| 细胞裂解液 | 温和裂解,保留互作 | 裂解过猛 → 互作丢失 |
| Wash buffer A / B | 两段梯度洗涤 | 洗不干净 → 背景高 |
| Anti-FLAG 磁珠 | 捕获带标签 Bait | 磁珠批次差异 |
| 洗脱肽(冻干粉) | 温和洗脱 | 强酸洗脱 → 蛋白变性 |
| PC 细胞裂解液 | 阳性对照 | 没有对照 → 无法判断富集是否成功 |
| Anti-FLAG-HRP | 富集效果验证 | 不做验证 → 直接浪费机时 |
| 磁控珠 / 磁力架 / 浓缩柱 | 流程配套 | 器材不匹配 → 样本损失 |

磁珠捕获、洗涤、洗脱,三步都在盒子里
规格按 Tests 分三档:IP01A 2 Tests、IP01B 3 Tests、IP01C 6 Tests。裂解液、磁珠、洗脱肽的装量随 Tests 同步放大,不是简单加倍。
二、IP02 多出来的那一步,是"能比较"
IP01 下游用 LFQ/iBAQ 定量,能回答"哪些蛋白跟 Bait 一起被拉下来"。但它回答不了"结合强度变了没有"。IP02 把 SILAC 培养基与 IP01 组合,制备 SILAC-IP 样本,同一张谱里同时比较两组样本的结合差异,既能锁定特异性互作,也能搭出互作网络。
| 组合 | 培养基 | IP 部分 | 适用 |
|---|---|---|---|
| IP02A | SIP05/SIP06 K8R10 | IP01A 2 Tests | 两组样本,标准型 |
| IP02A (Elite) | SIP11/SIP12 L3 | IP01A 2 Tests | 两组样本,经济型 |
| IP02B | SIP15/SIP16 3-plex | IP01B 3 Tests | 三组样本,标准型 |
| IP02B (Elite) | SIP17/SIP18 3-plex Elite | IP01B 3 Tests | 三组样本,经济型 |

富集是否成功,先看胶,再决定要不要上机
三、为什么"自己做"经常做不出来
质谱级 Co-IP 的失败,很少是某一个试剂的问题,而是匹配问题:裂解液强度、洗液盐浓度、磁珠载量、洗脱方式,这四项只要有一项偏离,结果就是"有条带但背景一片"。试剂盒的核心价值是把这四项固定成一套经过验证的组合。

厂家 DEMO 数据中的 IP 富集胶图,用于判断富集效率
四、上手难度:新手能不能跑
厂家在资料里明确写了"试剂盒技术流程已高度优化,新手可完全驾驭"。这句话的实际含义是:流程被压缩成按步加液、按步洗涤、按步洗脱,不需要自己算缓冲液配方。对没有质谱经验的分子生物学实验室,这一点比参数更重要。
适合先试的场景
手上已有带 FLAG 标签的 Bait 构建、想在一个月内拿到互作候选名单的课题组,用 IP01 跑一轮 DEMO 流程,比从零搭体系更可控。
先把实验目标说清楚,再谈选型
告诉我 Bait 蛋白名称、标签类型、样本物种、是否需要定量比较,可以给出 IP01 或 IP02 的具体规格建议。
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互作发现的目标,是把网络画出来,而不是拿到一条条带

裂解、洗液、磁珠、洗脱肽全部在盒内

DEMO 数据:富集后可直接在磁珠上酶解
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